PICO-PARCC: Plateforme d’imagerie confocale et biphotonique

La microscopie confocale est une variante permettant de détecter et de réaliser des images de l’échantillon à trois dimensions avec une bonne résolution. La microscopie biphotonique offre des possibilités sans précédent pour la visualisation des processus biologiques in vivo. Grâce à sa faible phototoxicité et à l’imagerie profoondeur des tissus, la microscopie biphotonique est un outil puissant pour élucider la dynamique temporelle des comportements cellulaires, transformant ainsi notre compréhension des pathologies cardiovasculaires.

Pour comprendre et cibler les pathologies cardiovasculaires, nous visons à visualiser et à manipuler les cellules chez les animaux vivants. Dans la plupart des études biologiques in vivo, différents animaux sont sacrifiés à des stades précis, pour obtenir des instantanés des événements au fil du temps. L’avantage de la microscopie biphotonique est qu’elle permet d’apprécier la dynamique et la complexité d’un phénomène biologique chez le même animal au fil du temps. L’imagerie à haute résolution identifie avec précision tout mécanisme thérapeutique potentiel et son impact sur la fonctionnalité des vaisseaux (hémodynamique, perfusion et fuite).

Associée à des outils génétiques utilisant des promoteurs spécifiques qui dirigent l’expression de protéines rapporteuses fluorescentes dans des territoires précis, l’imagerie biphotonique permet de suivre chaque type de cellules désiré dans la pathologie sélectionnée et d’en suivre l’évolution.

Expertises

• Chirurgie pour fenêtre crânienne
• Imagerie intra vitale (dynamique, perfusion et fuite)
• Implantation intracrânienne de sphéroïdes de glioblastome
• Photocoagulation dans une région d’intérêt
• Imagerie du flux de calcium dans les cellules vivantes
• Imagerie sur coupes épaisses
• Contraste SHG sur animaux vivants, coupes et cellules
• Module 3 D, pour la reconstruction en 3D
• Huygens, pour la déconvolution 3D.

Equipements

• Leica SP8 confocal laser scanning microscope Microscope confocal à balayage laser
• Leica SP8 Laser UV 405, laser bleu 488, laser vert 552, laser rouge 638
• Détecteurs, PMT et HyD GaAaP
• Microscope biphotonique Leica SP8. Équipé d’un faisceau laser biphotonique à deux rayons (InSight X3, Spectra Physics), notre appareil couvre une large plage d’excitation du spectre électromagnétique proche infrarouge (de 680 à 1300 nm). Cela nous permet d’exciter simultanément plusieurs fluorophores et d’acquérir rapidement des images tridimensionnelles à haute résolution de vastes zones tissulaires. Le module de détection DIVE est la dernière génération de détecteurs non scannés qui offre le système de détection le plus rapide et le plus sensible disponible sur le marché. De plus, ils sont placés à côté de l’objectif afin de réduire la distance entre l’échantillon et le détecteur pour éviter la perte de signal. Ces réglages multiplient par 2 ou 3 la sensibilité des détecteurs par rapport aux détecteurs placés dans la tête du scanner (descanned), ce qui permet une meilleure sensibilité et une pénétration plus profonde des tissus (jusqu’à 800 µm).

Services proposés

Formation

• Formations théoriques, pratiques et obligatoires aux microscopes confocal et biphotonique
• Formations pour la chirurgie de la fenêtre crâniale
• La plateforme accompagnera les utilisateurs jusqu’à leur entière autonomie.
• Imagerie Intravitale
• Imagerie sur coupes épaisses
• Imagerie pour suivre le flux de calcium dans les cellules vivantes
• Contraste SHG -Traitement d’image (ImagJ, Huygens)
• Développement Technique/Chirurgie
• La plateforme peut aider à développer les techniques d’imagerie ainsi que les chirurgies selon les projets.

Service de prestations

•  Chirurgie pour fenêtre crânienne. La plateforme peut également fournir l’acquisition des lames, l’imagerie de souris vivantes et l’analyse en fonction des demandes