Plateau Imagerie Cellulaire et Cytométrie (PIC2) de BFA

Présentation

Le plateau Imagerie cellulaire et cytométrie, créé en 2009 en même temps que l’unité BFA, donne accès à un équipement en imagerie cellulaire permettant l’observation dynamique de biomolécules dans des systèmes biologiques vivants. Le plateau est ouvert à l’ensemble des équipes de l’unité et est implanté dans le bâtiment Buffon du campus des Grands Moulins.

Activités

Expertises

• Cytomérie en flux ;
• microscopie à onde évanescente.

Équipements

Pour la partie cytométrie, le plateau est équipé d’un FACS Aria II (BD Biosciences), un analyseur-trieur à haut débit comportant :

1. Une chambre d’injection de l’échantillon à température ajustable ;
2. Une cuve de “cell flow” à alignement fixe et à haute sensibilité de fluorescence ;
3. Deux lasers solides, aux longueurs d’onde de 488-nm et 633-nm, offrant la possibilité de détecter 12 paramètres dont 10 fluorochromes.

Pour la partie TIRFM, le plateau est équipié d’un montage NIKON pour microscopie TIRF par objectif. Ce système est installé sur un microscope inversé à fluorescence (Ti-Eclipse). Le microscope possède une chambre thermostatée (Life Imaging Series) ainsi qu’un système PFS (Perfect Focus System).
Le système comporte :

1. Les sources lumineuses suivantes : un système d’éclairage à fibre de mercure Intensilight de Nikon ; deux lasers 50mW Cobolt SLM (Single-Longitudinal Mode) permettant d’exciter la fluorescence à 488 nm et 560 nm ;
2. Deux objectifs: un CFI Achromat LWD ADL 20X et un CFI Apochromat 60X TIRF O.N. 1.49 à huile permettant une réflexion totale du faisceau laser ;
3. Une caméra Photometrics EMCCD QuantEM 512SC (Roper Scientific) ;
4. Un logiciel de pilotage et d’acquisition MetaMorph (Molecular Devices).

Services proposés

Les activités proposées sont à destination prioritaires des membres de l’unité BFA.
Toutefois, le plateau peut être ouvert à des équipes extérieures dans le cadre de collaborations scientifiques.