Plateforme d’histologie BIOSCAR (Lariboisière)
Présentation
La plateforme d’histologie BIOSCAR est spécialisée dans le traitement et l’analyse des tissus minéralisés. Elle est ouverte aux différentes équipes du site et aux équipes extérieures, institutionnelles ou privées. Tous les équipements sont accessibles en mise à disposition avec formation du personnel ou en prestation sur demande après étude du projet.
La plateforme s’engage à proposer un service de qualité associé à un accompagnement personnalisé tout le long de la mise en œuvre du projet.
Activités
Expertises
Plusieurs champs d’expertise sont proposés sur la plateforme d’histologie BIOSCAR et s’articulent autour de 1) l’étude des tissus durs non décalcifiés et de 2) l’étude des tissus durs décalcifiés ou mous.
L’inclusion des tissus durs non décalcifiés en résine de méthylmétacrylate va permettre :
-la quantification des paramètres osseux statiques (marquages ou colorations des ostéoblastes, ostéoclastes et ostéocytes)
-la quantification des paramètres de formation dynamique
-l’analyse de la matrice osseuse et de son état de minéralisation (coloration spécifique)
-la réalisation de coupes épaisses, par exemple pour l’analyse des microcracks
L’inclusion des tissus durs décalcifiés ou mous en paraffine ou en OCT va permettre :
-la quantification des paramètres de prolifération/survie cellulaire (apoptose des cellules osseuses, prolifération)
-l’étude de la vascularisation et du micro-environnement médullaire par immunomarquage
-la caractérisation des cellules osseuses et leurs états de différenciation par immunomarquage
L’histologie peut, par ailleurs, être couplée à l’analyse par imagerie proposée sur notre autre plateforme dédiée, entre autre pour les mesures de densité et de morphologie osseuse.
Equipements
La plateforme propose différents équipements en mise à disposition et/ou en prestation :
Préparation des échantillons
-un appareil à imprégnation paraffine (équipement en cours d’acquisition)
-une plateforme d’inclusion des prélèvements paraffine MM France EC500
Coupe des échantillons
-deux microtomes résine (Leica SM2500 et Leica SM2500S)
-un cryostat ThermoScientific NX70
-deux microtomes paraffine (Leica RM2255 et Leica Autocut)
-une polisseuse Q ATM QPOL 250 M1
-un isomètre Buehler Low Speed Saw
Analyses d’image
-deux postes de microscopie optique couplés à des analyseurs d’image Microvision Instruments (Nikon Optiphot2 et Nikon Eclipse 50 avec lumière polarisée)
-un poste de microscopie optique avec platine motorisée couplé à un analyseur d’image sur écran tactile et stylet Microvision Instruments (AxioImager M2 Zeiss en cours d’acquisition)
-un microscope à fluorescence avec sectionnement optique par illumination structurée Zeiss Apotome (DAPI, FITC, dsRed, Cy5)
-un microscope confocal Zeiss LSM800 (cube filtre DAPI, FITC, Rhodamine) avec platine motorisée et lasers 405, 488, 561 et 640 nm
Services proposés
La plateforme d’histologie BIOSCAR propose les prestations suivantes, sur demande et après étude du projet :
-Préparation des prélèvements (imprégnation, inclusion)
-Coupe des prélèvements (paraffine, résine, basse température)
-Colorations
-Immunohistochimie
-Analyse d’histomorphométrie osseuse avec analyses des paramètres statiques et dynamiques
-Toutes analyses spécifiques aux tissus durs non décalcifiés, sur demande
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