Cellule d’Ingénierie Génétique et d’Expression (CIGEx)

Présentation

La plateforme CIGEx (Cellule d’Ingénierie Génétique et d’Expression) propose des prestations de biologie moléculaire et de biochimie des protéines en s’appuyant sur une expertise reconnue et des technologies adaptées à chaque demande.

Elle fait partie du réseau de plateformes de l’unité Stabilité Génétique, Cellules Souches et Radiations (SGCSR – UMR-E 008) située au CEA de Fontenay-aux-Roses (deuxième étage du bâtiment 5, sur le campus IRSN). Comme toutes les plateformes de l’unité, la plateforme CIGEx est ouverte à la communauté scientifique académique et industrielle.

Activités

Expertises

Notre plateforme dispose du savoir-faire et des équipements nécessaires à la réalisation des expériences de clonage moléculaire et de biochimie des protéines, de leur conception à la réalisation expérimentale. Notre équipe se compose de 4 personnes à temps complet et possède une expertise reconnue dans nos domaines d’expertise.

La plateforme CIGEx propose ses services dans les domaines suivant :
(1) Biologie moléculaire pour le clonage des gènes d’intérêt, pour la mutagenèse, pour l’ingénierie génétique ;
(2) Biochimie des protéines (expression dans différents systèmes, tests d’interaction, purification à homogénéité des protéines recombinantes) ;
(3) Design et de clonage des ARNg pour les expériences de CRISPR/Cas9 ;
(4) Préparation des banques pour le séquençage haut débit notamment pour les expériences de « single-cell RNA seq. » ;
(5) Production de lentivirus.

La plateforme CIGEx a été conçue avec comme objectifs de :
– fournir des outils et des technologies performantes ainsi qu’un savoir faire reconnu ;
– assurer un suivi informatisé de toutes les étapes et un contrôle de la qualité de chaque opération ;
– procurer un encadrement scientifique et technologique aux utilisateurs ;
– assurer la formation des étudiants et des scientifiques.

Equipements

Pour les prestations de Biologie Moléculaire, la plateforme CIGEx dispose de :
– 1 thermocycleur SimpliAmp (Thermofisher) ;
– 1 spectrophotomètre Nanodrop (Thermofisher) ;
– 1 incubateur-agitateur Minitron (Infors) ;
– 1 incubateur-agitateur Multitron (Infors) ;
– 1 centrifugeuse 5810R (Eppendorf) ;
– 1 système d’encapsulation de cellules Chromium (10x Genomics) ;
– les équipements permettant de réaliser des cultures cellulaires (hotte à flux laminaire, incubateur et centrifugeuse).

Pour les prestations de Biochimie des Protéines, la plateforme CIGEx dispose de :
– 1 système FPLC Akta Purifier 10 (Cytiva) ;
– 1 incubateur-agitateur Minitron (Infors) ;
– 1 incubateur-agitateur Multitron (Infors) ;
– 1 centrifugeuse 5810R (Eppendorf) ;
– 1 centrifugeuse haute vitesse RC6+ (Thermofisher) ;
– 1 ultracentrifugeuse Optima XE90 (Beckman) ;
– les équipements permettant de réaliser des cultures de cellules d’insectes (hotte à flux laminaire, incubateur et centrifugeuse).

Services proposés

L’équipe de la plateforme CIGEx est à l’écoute des demandeurs et proposera les technologies adaptées pour répondre au mieux aux projets déposés.

Les prestations de la plateforme CIGEx en biologie moléculaire vous permettront de réaliser :
– le clonage moléculaire et la mutagenèse de gène(s) d’intérêt en utilisant les technologies les plus appropriées à chaque demande (GatewayTM, SLIC, Gibson-CloningTM, Restriction-ligation, « Rollingcircle ») ;
– l’ingénierie moléculaire de vos plasmides ;
– le design et le clonage des ARNg pour vos expériences de CRISPR/Cas9 ;
– la préparation des banques pour le séquençage haut débit dans le cadre d’expériences de “Single-cell RNA Seq”.

Les prestations de la plateforme CIGEx en biochimie des protéines vous permettront de réaliser :
– la production de vos protéines recombinantes d’intérêt dans les systèmes d’expression bactérien et de cellules d’insecte infectées par des baculovirus ;
– de réaliser des tests d’interaction par « pull-down » (IMAC, GST) ou par immuno-précipitation.

Enfin la plateforme CIGEx propose une prestation de production de lentivirus.

Thématiques

Contact

18 Route du Panorama
92260 Fontenay-aux-Roses

email
Site web

Tutelles

 CEA, Inserm, Université Paris-Saclay, Université Paris-Cité

Unité de rattachement

 UMR-E 008 – Stabilité génétique, Cellules Souches et Radiations

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